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目 录1

译者的话………………………………………………… i序言…………………………………………………………iii第一部分概论第一章生物化学研究的一般原理1

1.1 引言1

1.2 pH和缓冲液2

1.2.1pH对生物学过程的影响2

3.11.3空心纤维的分离 14

1.2.2生物学研究中所用的缓冲液4

1.2.3受pH影响的氨基酸和蛋白质的离子化6

4.3.3操作过程 117

1.3生物化学研究的途径9

1.4整体动物的研究12

1.5等渗盐溶液16

1.6分离器官的灌注法17

1.7器官和组织切片技术18

1.8植物材料的使用18

1.9组织和细胞培养技术19

1.10细胞分级分离实验指导21

1.10.1组织和细胞匀浆的制备22

4.4.2幕式（连续）电泳 122

1.10.2悬浮介质的选择23

1.10.3裂解组织和细胞的方法24

参考读物27

2.1原理29

第二部分分离方法29

第二章离心技术（由A.Griffiths编写）29

2.2制备性离心32

2.2.1差级离心32

2.2.2分级区带离心35

2.2.3等密度离心35

2.2.4平衡等密度离心37

2.3梯度的制备和取出37

2.3.1梯度的性质37

2.3.2不连续的或者分层的密度梯度技术38

2.3.3连续的密度梯度技术38

2.4制备离心机及其应用39

2.3.4从离心管中取出梯度溶液39

2.5.1 角式和水平式转头40

2.5转头的设计40

2.5.2连续运转的转头41

2.5.3 Anderson或区带转头41

5.2.1仪器装置 142

2.6亚细胞部分的分析44

2.7差级离心分级分离结果的表示45

5.2.2应用 147

2.8分析性超速离心47

2.9.1分子量的测定50

2.9分析性超速离心的应用50

2.9.2大分子纯度的估价52

2.9.3检测大分子中构象的变化53

参考读物53

5.3.2仪器装置 155

5.3.1原理 155

第三章层析技术（由B.L.Williams编写）55

3.1层析的一般原理55

3.2.1原理58

3.2吸附层析58

3.2.2柱层析59

3.2.3薄层层析（t.l.c.）60

5.4.3应用 161

3.3分配层析64

3.3.1 纸层析64

5.6.4火焰分光光度法的应用 166

3.4.1原理67

3.4逆流分溶67

3.3.2分配柱层析67

5.7.1原理 168

3.4.2装置70

5.8.1原理 171

3.5气－液层析（g.l.c.）71

3.5.1原理71

3.4.3应用71

3.5.2固体支持物73

3.5.3固定相73

3.5.4柱的性能74

3.5.5检测系统75

3.5.6保留值与定性分析76

5.9.2仪器装置 176

3.5.7加样76

3.5.9样品的转化77

3.5.8定量分析77

3.6.1原理78

3.6离子交换层析78

3.5.10制备性气－液层析78

3.6.2离子交换柱层析81

6.1.2原子的稳定性和放射性 182

3.6.3离子交换纸层析84

3.7通透层析84

3.7.1原理84

6.1.6放射性的单位 185

3.7.2通透层析的材料85

3.7.3凝胶过滤的理论88

3.7.4凝胶过滤的实验技术89

3.7.6通透层析的应用91

3.7.5薄层凝胶过滤（t.l.g.）91

3.8.1原理92

3.8亲和层析92

3.8.3配位体的选择及其与基质的联接94

3.8.2不溶性基质的选择94

3.8.4亲和柱的吸附和洗脱95

3.8.5亲和层析的应用96

3.9高压液体层析97

3.10柱层析法的一般技术97

3.10.1柱97

3.10.2装柱98

3.10.3加样99

3.10.4洗脱99

3.10.5梯度洗脱100

3.10.6分部收集100

3.11.1原理102

3.10.7各部分的分析102

3.11膜和空心纤维分离法102

3.11.2膜分离103

参考读物105

4.1前言106

第四章 电泳技术（由M.G.Davis和I.Simpkins编写）106

4.2.2电场108

4.2.1 样品108

4.2影响迁移率的因素108

4.2.3缓冲液109

4.2.4支持介质111

4.3.1装置112

4.3一般技术112

4.3.2支持介质的制备和特性113

4.4.1高压电泳120

4.4特殊技术120

4.4.3不连续的（圆盘）电泳123

4.4.4免疫电泳127

4.4.5等电聚焦128

4.4.6等速电泳129

4.5电泳的应用130

参考读物131

第二部分补遗132

第三部分分析方法136

5.1.1辐射，能量和原子结构136

5.1基本原理136

第五章光谱技术（由D.H.Burrin编写）136

5.1.2光谱类型及其生化用途138

5.1.3光吸收的基本定律140

5.2可见光和紫外光分光光度法141

5.3萤光光谱测量法155

5.3.3萤光法与吸收分光光度法相比的优缺点157

5.3.4 应用157

5.4红外分光光度法158

5.4.1 原理159

5.4.2仪器装置159

5.5Raman分光光度法161

5.6.1 原理162

5.6火焰分光光度法162

5.6.2原子发射分光光度法的仪器装置163

5.6.3原子吸收分光光度法的仪器装置166

5.6.5原子萤光光谱光度法167

5.7 电子自旋共振波谱法168

5.7.2仪器装置169

5.7.3应用170

5.8核磁共振波谱法171

5.8.2仪器装置173

5.8.3应用174

5.9.1原理175

5.9 质谱法175

5.9.3应用178

5.10光谱技术总结表180

参考读物180

第六章放射性同位素技术（由K.H.Goulding编写）181

6.1放射性的本质181

6.1.1原子结构181

6.1.3放射性衰变的类型182

6.1.4放射性衰变的能量183

6.1.5放射性衰变率184

6.1.7射线与物质的相互作用186

6.2放射性的探测和测量188

6.2.1绝对计数还是相对计数？188

6.2.2利用气体电离的方法188

6.2.3利用激发的方法193

6.2.4利用照相乳胶曝光法204

6.3 放射性计数和数据分析的实用方面204

6.3.1本底计数204

6.3.2死时间205

6.3.3半衰期205

6.3.4几何学因素205

6.3.5 自吸收205

6.3.6统计学206

6.5生物科学中放射性同位素的应用207

6.4放射性示踪实验所具有的优点207

6.5.1代谢途径的研究208

6.5.2在吸收和转移研究中放射性同位素的应用209

6.5.3用放射性同位素来测定代谢周转期209

6.5.4放射性同位素的临床应用209

6.5.5放射性同位素的药理学应用210

6.5.6同位素稀释分析法210

6.5.7放射定年211

6.5.8生态学研究中放射性同位素的应用211

6.5.9在食物和设备的消毒中放射性同位素的应用211

6.5.10用放射性同位素作为诱变剂212

6.6安全方面212

参考读物213

6.7结论213

第七章电位，电势和极谱测定技术（由M.R.Jenkins编写）214

7.1 引言214

7.2标准氢电极215

7.3参考电极216

7.4pH的测量217

7.4.1玻璃电极218

7.4.2 pH指示剂221

7.4.3 pH稳定计224

7.4.4用于动力学工作的灵敏pH计226

7.5离子选择电极226

7.6氧化还原电位228

7.6.2氧化－还原指示剂231

7.6.1氧化－还原反应的电位滴定231

7.7极谱法235

7.7.1电流滴定238

7.8氧电极238

7.8.1氧电极的类型239

7.8.2 Rank电极操作方法241

7.8.3氧电极的用途241

7.9二氧化碳电极243

参考读物243

第八章测压技术（由K.Wilson编写）245

8.1 引言245

8.2测压法的类型246

8.3.1仪器、操作和原理247

8.3 Warburg定容测压计247

8.3.2 Warburg测压计的校准250

8.4 Gilson差示呼吸计250

8.5 Warburg和Gilson测压法的操作方式251

8.6测压法的应用253

8.6.1测压法研究的范围253

8.6.2组织切片和匀浆的研究254

8.6.3呼吸商的测定255

8.6.4代谢商的测定259

8.6.5线粒体的研究259

8.6.6光合作用的研究260

参考读物260

索引261